想了解的傷口愈合插件嗎?看這里!
更新時間:2021-11-16 點(diǎn)擊次數(shù):1216次
傷口愈合插件可以在藥物處理或者基因沉默/過表達(dá)后進(jìn)行細(xì)胞遷的分析。重要的是,未處理的對照組可以在同一個培養(yǎng)器皿里面接種,分析,共享同樣的培養(yǎng)液。和其他傷口形成技術(shù)不同,培養(yǎng)愈合插件適合2D侵襲實(shí)驗(yàn)和共培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),同時可以實(shí)驗(yàn)兩種,三種甚至四種細(xì)胞類型或者處理方式。
如何利用傷口愈合插件做一個傷口愈合、遷移實(shí)驗(yàn)?典型的傷口愈合和遷移實(shí)驗(yàn)的結(jié)果就是隨著時間的變化細(xì)胞覆蓋面積(傷口閉合)的變化。進(jìn)行傷口愈合和遷移實(shí)驗(yàn)是一個非常簡單的操作:
1.在細(xì)胞單層間制造出一個物理傷口。
2.在不同時間點(diǎn)進(jìn)行拍照,或者進(jìn)行實(shí)時成像觀察細(xì)胞遷移到傷口的過程。
3.采用手動或者自動化軟件分析傷口閉合的速率,這就是典型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
由于特殊設(shè)計(jì)的底部,傷口愈合插件黏附在表面,阻礙了壁下任何細(xì)胞的生長。移除培養(yǎng)插件后,新形成的無細(xì)胞傷口處沒有任何殘留。這種方法可以重復(fù)地形成高度一致的沒有任何細(xì)胞的傷口。當(dāng)放置在平整,干凈的表面,培養(yǎng)插件2孔給培養(yǎng)的細(xì)胞提供了兩個儲液池,中間被500μm厚度的壁給分隔開。細(xì)胞接種在儲液池中培養(yǎng),一直到他們貼壁,形成單細(xì)胞層。移除表面的硅膠插件后會形成兩個精確大小的細(xì)胞斑塊,由一個大小和分割壁一樣寬度的區(qū)域所分開。接著就可以通過活細(xì)胞成像或者在不同時間點(diǎn)拍照來監(jiān)測細(xì)胞遷移。